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本试剂盒是一种可以快速从组织、小鼠尾部、单根毛发、细胞培养液、唾液、精液等动物组织中提取微量基因组DNA并通过PCR扩增进行检测的试剂盒。使用该试剂盒可以在12分钟内完成基因组DNA提取，整个操作过程不需要离心、有机溶剂等复杂抽提步骤。提取的基因组DNA可以直接用于PCR扩增、定量分析等实验。提取的基因组DNA置于4℃至少保存3个月，可用于50～100个PCR反应。


本试剂盒与离心柱型DNA提取试剂盒比较：

	微量提取型	离心柱型
样品量	<5mg	10～100mg
时间	12分钟	50分钟左右
离心	无需	需要离心
酚/氯仿	无需	无需
纯度	未经纯化	纯度高，无污染
应用	PCR诊断	PCR、酶切、Sourthern杂交等

• 操作简单：应用该试剂盒无需离心、酚抽提等复杂步骤，且整个流程只需12分钟。
  
• 高灵敏度：可用于提取微量样品的基因组，且可直接用于PCR扩增。
  
• 应用广泛：可从多种动物组织中提取基因组应用于各种相关PCR分析。

• SNP基因分型和突变检测。
  
• DNA测序和克隆。
  
• 转基因动物的靶基因检测。

样品类型	所需数量
组织	1～5mg
细胞	100～10000个
唾液	20μL
毛发	1～3根带毛囊毛发

组分	50T	500T
Tissue-A Buffer	2×1.25mL	25mL
Tissue-B Buffer	2×1.25mL	25mL
2×Super Taq PCR Mix（with Dye）	1mL	10×1mL

保存：-20℃，避免反复冻融，有效期1年。



图1．分别取鸡的肌肉、肝脏、脑、心、人发根、唾液、口腔细胞样品，应用本产品提取基因组DNA，并以提取的基因组为模板，用2×Taq PCR Mix分别扩增750bp的鸡ApoB基因和404bp的人Dnmt1基因。

• 取50μL Tissue-A Buffer置于200μL的EP管中。
  
• 取样：不同的组织取样方法不同
  
  • 动物组织：以高压灭菌的手术剪取新鲜或冰冻的动物组织1～5mg，不要超过5mg(重要)，立即置于Tissue-A Buffer中，短暂涡旋务必使Tissue-A Buffer覆盖组织。
    
  • 小鼠尾部：以高压灭菌的手术剪取小鼠尾部，不要超过5mg，立即置于Tissue- A Buffer中，短暂涡旋务必使Tissue-A Buffer覆盖小鼠尾部组织。
    
  • 毛发：取1-3根带有毛囊(重要)的毛发，取其根部置于50μL的Tissue-A Buffer中，短暂涡旋务必使Tissue-A Buffer覆盖毛发根部。
    
  • 唾液或口腔黏液：吸取15μL的唾液或口腔黏液置于50μL的Tissue-A Buffer中，短暂涡旋以充分混匀。
    
  • 细胞培养液：吸取15μL的细胞培养液(100～10000个细胞)置于50μL的Tissue-A Buffer中，短暂涡旋以充分混匀。
• 将加有样品和Tissue-A Buffer的EP管置于PCR仪上95℃加热10min。
  
• 加热结束后，加入50μL的Tissue-B Buffer，然后用移液器Tip吹吸混匀，切勿剧烈振荡。
  
• 取步骤4所得溶液作为基因组模板，应用2×Super Taq PCR Mix进行PCR扩增，反应体系为：
  

  成分	用量
  2×Super Taq PCR Mix（with Dye）	10μL
  Forward primer (20μM)	0.4μL
  Reverse primer (20μM)	0.4μL
  上述模板	0.8～2μL
  ddH2O	至20μL

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